Synthetic crRNA服务
CRISPR Cas9/gRNA RNP（核糖核蛋白复合物）由CRISPR RNA(crRNA)和tracrRNA部分双链RNA复合物及cas蛋白组成。不同于传统的Cas9/gRNA质粒，crRNA和tracrRNA寡聚核苷酸是完整的组分，不需要细胞自身转录得到CRISPR相关组分。Cas9 RNP与其它系统相比有多个优点：
- Cas9 RNP在转染后即刻发生高效率基因编辑
- Cas9 RNP通过蛋白降解可快速清除以降低脱靶可能性
- Cas9 RNP是in vivo基因编辑的完美方案
腾云宝提供预先设计的RNP靶点，化学合成crRNA与tracrRNA，与cas9简单混合后，即可用于基因编辑。
服务优势
- 提供gRNA设计：可从Broad研究所验证的gRNA序列中选择，或由您自主设计；
- gRNA以部分双链的crRNA:tracrRNA形式提供，不再需要体外转录实验；
- 即刻可用于转染等实验：只需与蛋白混合，得到复合物后，即可用于细胞实验；
- 灵活订购，多种规格可选。
服务内容
| Catalog # | 服务名称 | 交付量 | 交付周期 |
|---|---|---|---|
| SC1838 | crRNA:tracrRNA |
2 nmol 5 nmol 10 nmol 20 nmol |
10-14天 (包含快递时间) |
| SC1841 | GenCRISPR Cas9-2NLS nuclease
|
10 μg (1 mg/ml)* 25 μg (1 mg/ml) |
现货* |
| SC1839 | HPRT阳性对照
|
2 nmol | 现货* |
*Cas9-2NLS nuclease 10μg相当于62.5 pmol
如何订购
Cas9 RNP workflow
Figure 1: Cas9 RNP workflow
Cas9 RNP系统操作简单，使用方法仅两步: (1)将Cas9蛋白与合成的crRNA : tracrRNA孵育形成RNP；(2)将RNP导入细胞（Figure 1)。如进行基因敲入，还需将HDR模板也一起导入细胞。在开始实验之前，我们建议您先将Cas9/gRNA 复合物在体外及test细胞系中进行测试，以评估编辑效率。关于如何形成RNP复合物及操作预实验可见操作手册。
通常采用电穿孔或脂质介导转染的方法，将Cas9 RNP复合物导入细胞。针对不同的细胞类型，您可能需要进行一些实验，才能选择较好的转导方式。不过，Cas9/gRNA 质粒转导方法有时同样也适用于RNP转导。关于此操作的更多细节，可在Addgene网站查看。
交付内容
- 合成的crRNA:tracrRNA可交付2 nmol, 5 nmol, 10 nmol or 20 nmol的量
- 以冻干的形式发货
- 随Cas9蛋白(10 μg或25 μg)附赠Cas9核酸酶反应缓冲液
- 随货附操作指南
CRISPR产品和服务执照许可
- 腾云宝为客户提供的GenCRISPR产品和服务得到美国 Broad 研究所，哈佛大学和麻省理工学院授权许可。GenCRISPR产品和服务受到US 8,697,359, US 8,771,945, US 8,795,965, US 8,865,406, US 8,871,445, US 8,889,356, US 8,889,418, US 8,895,308, US 8,906,616及多国同等专利保护。
- GenCRISPR产品和该服务中生成的试剂只能作为工具用于科学研发目的，不得用于以下用途：
（1）任何人体或临床的使用；（2）修改任何人类生殖体系，包括改变人类胚胎或人的生殖细胞的DNA；（3）任何作为兽药或在牲畜体内的使用；（4）制造、批发、进口、出口、运输、销售、许诺销售、市场营销及推广，或其他开发，对人类或动物的测试服务，治疗或诊断。 - GenCRISPR服务使用者和产品的购买者：
不可转让GenCRISPR产品和该服务中生成的试剂于第三者。GenCRISPR产品和该服务中生成的试剂只能作为工具用于科学研发目的，不得用于任何商业目的。
客户应明确知晓上述对试剂用途的限制，并自行承担因违反该限制而产生的法律责任。